La agregación espontánea de la mutante q8h de la microcina e492 anula la actividad bactericida y aumenta el efecto citotóxico en células tumorales

Abstract

La microcina E492 es una bacteriocina producida por Klebsiell pneumoniae RYC492 y activa sobre cepas de Enterobatericeae. Su mecanismo de acción requiere del reconocimiento en la membrana externa de la célula sensible por los receptores de catecoles FepA, Fiu y Cir, y de la proteína TonB para ejercer su acción tóxica en la membrana citoplasmática de la bactería sensible. Mediante el estudio de mutaciones puntuales de la microcina E492 se identificaron aminoácidos que son necesarios para la actividad antibacteriana. Así, dos mutantes (PL-G18S y PL-G18D) en el péptido líder no exportan la microcina al medio extracelular. Por otro lado, la mutante PL-V5V permitió determinar que el predicho aminoácido 5 es el aminoácido en el cual se inicia la traducción de la microcina E492 madura (una vez procesado el péptido líder). Esta mutación impide la translocación a través de la membrana externa de la célula blanco, pero mantiene la capacidad de formar canales iónicos y de ser activa sobre esferoplastos de bacterias sensibles. La microcina E492 Q8H se encuentra principalmente en forma oligomérica y se agrega espontáneamente formando fibras amiloides, las cuales se detectaron mediante la unión de las fibras de microcina a colorantes específicos rojo Congo y tioflavina T. La formación de estas fibras amiloides axplica porqué la microcina E492 no es capaz de atravesar la membrana externa para ejercer su acción.